FORSCHUNG
Listeria
Ergebnisse der Bewertung der antimikrobiellen Aktivität von Constructive Microbes gegen das Bakterium Listeria monocytogenes
Da Constructive Microbes aus einer Mischung lebender Zellen mehrerer Bakterienarten bestehen, wurde im ersten Schritt des Experiments die Flüssigkeit (in den Verdünnungen 1:5 und 1:10) auf das PALCAM-Medium aufgebracht. Das Medium wurde aerob bei 30 °C für 48 Stunden inkubiert. Keiner der in Constructive Microbes enthaltenen Mikroorganismen war in der Lage, auf dem Medium zu wachsen. Somit konnte das PALCAM-Medium in den weiteren Schritten des Experiments verwendet werden, und jeder Nachweis von esculin-positiven Kolonien würde ausschließlich auf das Vorhandensein lebender Zellen von Listeria monocytogenes zurückzuführen sein, die der Flüssigkeit zugesetzt wurden.
Die Suspension von L. monocytogenes, wie zuvor beschrieben hergestellt (0,5 des McFarland-Standards), wurde im Verhältnis 1:1 mit der unverdünnten Flüssigkeit von Constructive Microbes gemischt (2 ml Listeria-Suspension + 2 ml Flüssigkeit) und bei Raumtemperatur inkubiert. Nach 24 und 48 Stunden sowie nach 5 Tagen des Versuchs wurden 0,5 ml der Mischung in den Verdünnungen 1:10, 1:100, 1:1.000 und 1:10.000 mit Kochsalzlösung hergestellt, und jeweils 0,2 ml jeder Verdünnung auf PALCAM-Medium inokuliert.
Die Platten wurden anschließend 24 Stunden bei 30 °C inkubiert. Zu jedem Untersuchungszeitpunkt wurde die Zahl der lebenden Zellen von L. monocytogenes anhand der Anzahl esculin-positiver Kolonien auf dem Medium bestimmt. Die Zahl der lebensfähigen Zellen nahm im Vergleich zum Ausgangswert auch nach 5 Tagen Kontakt mit der Constructive-Microbes-Flüssigkeit nicht ab. Es wurde jedoch festgestellt, dass die Intensität des Wachstums von Listeria (ausgedrückt durch den Durchmesser der Kolonien) streng von der Konzentration der Constructive Microbes abhing. Die Verdünnung 1:10 hemmte das Wachstum von L. monocytogenes vollständig (keine sichtbaren Kolonien, Abb. 1). Mit zunehmender Verdünnung der Mischung aus Constructive Microbes und Listeria-Zellen wurden die gebildeten Bakterienkolonien immer größer (ca. 0,1–0,2 mm bei Verdünnung 1:100 [Abb. 2], ca. 0,5 mm bei 1:1.000 und ca. 1 mm bei 1:10.000 [Abb. 3]).
Abb. 1. PALCAM-Medium, inokuliert mit Listeria monocytogenes, die 24 Stunden mit Constructive Microbes behandelt wurde (Verdünnung 1:10). Es ist kein Bakterienwachstum vorhanden.
Abb. 2. PALCAM-Medium, inokuliert mit Listeria monocytogenes, die 48 Stunden mit Constructive Microbes behandelt wurde (Verdünnung 1:100). Es sind zahlreiche (unzählbare), kleine esculin-positive Kolonien vorhanden.
Abb. 3. PALCAM-Medium, inokuliert mit Listeria monocytogenes, die 5 Tage mit QCE5 SPORE TECHNOLOGY® behandelt wurde (Verdünnung 1:10.000). Es sind zahlreiche esculin-positive Kolonien mit einem Durchmesser von ca. 1 mm vorhanden.
Abschließende Schlussfolgerung
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Constructive Microbes zeigen eine starke bakteriostatische Aktivität gegen Listeria monocytogenes, die sich in einer vollständigen Hemmung des Wachstums des Mikroorganismus bei einer Verdünnung von 1:10 manifestiert.